CRISPR-Cas9 システム: 遺伝子編集の新たな夜明け

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CRISPR-Cas9 system: A new-fangled dawn in gene editing

D Gupta, O Bhattacharjee, D Mandal, MK Sen, D Dey… - Life sciences, 2019 - Elsevier

… an N terminal Mitochondrial targeting sequence (MTS) to direct its transport to the mitochondria
was … To overcome the limitations of REs for targeted mitochondrial genome editing ZFN & …

 

CRISPR-Cas9 system: A new-fangled dawn in gene editing

Abstract
Till date, only three techniques namely Zinc Finger Nuclease (ZFN), Transcription-Activator Like Effector Nucleases (TALEN) and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats-CRISPR-Associated 9 (CRISPR-Cas9) are available for targeted genome editing. CRISPR-Cas system is very efficient, fast, easy and cheap technique for achieving knock-out gene in the cell. CRISPR-Cas9 system refurbishes the targeted genome editing approach into a more expedient and competent way, thus facilitating proficient genome editing through embattled double-strand breaks in approximately any organism and cell type. The off-target effects of CRISPR Cas system has been circumnavigated by using paired nickases. Moreover, CRISPR-Cas9 has been used effectively for numerous purposes, like knock-out of a gene, regulation of endogenous gene expression, live-cell labelling of chromosomal loci, edition of single-stranded RNA and high-throughput gene screening. The execution of the CRISPR-Cas9 system has amplified the number of accessible scientific substitutes for studying gene function, thus enabling generation of CRISPR-based disease models. Even though many mechanistic questions are left behind to be answered and the system is not yet fool-proof i.e., a number of challenges are yet to be addressed, the employment of CRISPR-Cas9-based genome engineering technologies will increase our understanding to disease processes and their treatment in the near future. In this review we have discussed the history of CRISPR-Cas9, its mechanism for genome editing and its application in animal, plant and protozoan parasites. Additionally, the pros and cons of CRISPR-Cas9 and its potential in therapeutic application have also been detailed here.

• CRISPR-Cas9 システム: 遺伝子編集の新たな夜明け

  概要
  これまでのところ、ターゲットゲノム編集に利用できるのは、Zinc Finger Nuclease (ZFN)、Transcription-Activator Like Effector Nucleases (TALEN)、CRISPR-Associated 9 (CRISPR-Cas9) の 3 つの手法のみです。 CRISPR-Cas システムは、細胞内の遺伝子をノックアウトするための非常に効率的で、迅速、簡単、安価な技術です。 CRISPR-Cas9 システムは、ターゲットを絞ったゲノム編集アプローチをより適切で有能な方法に一新し、ほぼすべての生物や細胞タイプで困難な二本鎖切断による熟練したゲノム編集を促進します。 CRISPR Cas システムのオフターゲット効果は、ペアニッカーゼを使用することで回避されています。 さらに、CRISPR-Cas9 は、遺伝子のノックアウト、内因性遺伝子発現の調節、染色体遺伝子座の生細胞標識、一本鎖 RNA の編集、ハイスループット遺伝子スクリーニングなど、数多くの目的に効果的に使用されています。 CRISPR-Cas9 システムの実行により、遺伝子機能を研究するためのアクセス可能な科学的代替物の数が増幅され、CRISPR ベースの疾患モデルの生成が可能になりました。 多くの機構的な問題が解決されずに残され、システムはまだ完全ではありません。つまり、多くの課題がまだ解決されていません。 そして近い将来の彼らの治療。 このレビューでは、CRISPR-Cas9 の歴史、ゲノム編集のメカニズム、および動物、植物、原生動物の寄生虫への応用について説明しました。 さらに、CRISPR-Cas9 の長所と短所、および治療への応用におけるその可能性についても、ここで詳しく説明しています。

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